⑫ 染色
ウェルケ（Woelcke）染色法（髄鞘染色）
鉄ヘマトキシリンで髄鞘を染める染色法。
染色手順
| 1 | 薄切 | 15μm | |
|---|---|---|---|
| 2 | スライドに貼付け | シランコーティングのスライドグラスに貼付ける | |
| 3 | 脱パラフィン | キシレン | 3槽、各10分 |
| 4 | 脱キシレン | 100%エタノール | 3槽、各5分 |
| 5 | 浸水 | 95%、70%エタノール | 各5分 |
| 6 | 流水洗 | 水道水 | |
| 7 | 水洗 | 蒸留水 | |
| 8 | 媒染 | 2.5%鉄ミョウバン水溶液 | 一晩 |
| 9 | 水洗 | 蒸留水 | 10秒×3回 |
| 10 | 染色 | Heidenhainのヘマトキシリン染色液 | 1〜4時間 |
| 11 | 水洗 | 蒸留水 | 数回、1〜2時間、皮質が白くなるまで |
| 12 | 脱水 | 70%、95%エタノール | 各5分 |
| 13 | 脱水 | 100%エタノール | 3槽、各5分 |
| 14 | 透徹 | キシレン | 3槽、各10分 |
| 15 | 封入 |
染色液
Heidenhainのヘマトキシリン
使用直前に調整
- ヘマトキシリン1.5ｇを100%エタノール30mlに溶かす。
- 蒸留水270mlに加える。
- 飽和炭酸リチウムを15cc加える。
- 1 ～ 3 の順にまぜる。
ニッスル染色との重染色
- ウェルケ染色で髄鞘を染色した後に、ニッスル染色で核を染色すると、KB染色の代替となる。
- 特に凍結切片の場合、KB染色の代替染色となる。
- 凍結切片をKB染色すると非特異的反応が目立つことがある。
- ウェルケはKBよりも非特異的反応の目立たない標本ができる。
写真① ウェルケ染色（左）とKB染色（右）：凍結切片・大脳皮質
写真② ウェルケ+ニッスル染色（凍結切片・前額断）
写真③ ウェルケ+ニッスル染色（凍結切片・内包）
