⑫ 染色
ホルツァー（Holzer）染色
アストロサイトの突起内の線維成分をクリスタルバイオレットで青紫色に染色する。組織障害に反応し増殖するアストロサイトの線維成分やグリオーシスを肉眼で観察し、病変の分布や強弱を見るには非常に有用な染色法である。
染色手順
| 1 | 脱パラフィン | キシレン | 3槽、各10分 |
| 2 | 脱キシレン | 100%エタノール | 3槽、各5分 |
| 3 | 浸水 | 95%、70%エタノール | 各5分 |
| 4 | 媒染 ※1 | 燐モリブデン酸媒染液 | 1分 |
| 5 | 媒染 ※2 | クロロフォルム・アルコール混合液 |
- 濾紙（4枚重ね）に液を浸して切片上にかぶせて平均的に強く押し、ただちに液をたっぷりかける
- 切片が透き通るまで置く（10秒程度）
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| 6 | 染色 ※3 | 2%クリスタルバイオレット液 |
- クロロフォルム・アルコール混合液を捨てると同時にクリスタルバイオレット液でクロロフォルム・アルコール混合液をすべて流しきる
- 濾紙（４枚重ね）を切片上にかぶせて平均的に強く押し液を吸い取る
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| 7 | 洗浄 ※4 | 10%臭化カリウム水溶液 | 1分以上 |
| 8 | 分別 ※5 | アニリン・キシレン混合液 |
- 濾紙（4枚重ね）に液を浸して切片上にかぶせて平均的に強く押した後、液をかけてしばらく置く
- 15分おきぐらいに液を交換
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| 9 | 検鏡 | グリア線維以外が白くなるまで分別する |
| 10 | 洗浄 ※6 | キシレン | 2回、1分づつ |
| 11 | 透徹 ※6 | キシレン | 3槽、各10分 |
| 12 | 封入 ※6 | | |
作業ポイント
手順 ③ 〜 手順 ⑥ 解説ムービー
※1 媒染
| 作業 |
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燐モリブデン酸媒染液
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※2 媒染
| 作業 |
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クロロフォルム・アルコール混合液
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- クロロフォルム・アルコール混合液が染み込んだ濾紙を切片上にかぶせて平均的に強く押す
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- ただちにクロロフォルム・アルコール混合液をたっぷりかける
- 切片が透き通るまで置く（10秒程度）
※ クロロフォルム・アルコール混合液はすぐに蒸発するので、切片が乾かないよう、液を途中で注ぎ足しても良い。
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※3 染色
※4 洗浄
| 作業 |
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10%臭化カリウム液
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※5 分別
※6 洗浄、透徹、封入
| 作業 |
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キシレン数回
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染色液
配置
便利グッズ
注意
人体に有害な試薬を用いるので、ドラフト内で作業すること。
染色態度
アストロサイト
| 正常細胞・組織 |
異常構造・生理的変性構造 |
見えないもの |
| 突起の一部（近位）
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グリオーシス
- Isomorphic gliosis
- Anisomorphic gliosis
- 結節性硬化症の皮質結節
- Dissociation gliomyelinique
類でんぷん小体
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多数 |
動画でまなぶ染色態度
