⑫ 染色

Gomori’s one step trichrome method

膠原線維を緑色に核を黒紫に染色する。

• 染色手順
• 作業ポイント
• 染色液
• 染色結果

染色手順

1	脱パラフィン	キシレン	3槽、各10分
2	脱キシレン	100%エタノール	3槽、各5分
3	浸水	95%, 70%エタノール	各5分
4	流水洗	水道水
5	水洗	蒸留水
6	染色 ※1	Weigertの鉄ヘマトキシリン	10分
7	色出し	水道水	15分
8	染色	trichrome染色液	20分
9	分別	0.2％酢酸水	2分
10	脱水 ※2	95％エタノール	5分
11	脱水 ※3	100%エタノール	3槽、各5分
12	透徹	キシレン	3槽、各10分
13	封入

作業ポイント

※1 染色

作業
ヘマトキシリン Weigertの鉄ヘマトキシリンの代わりにMeyer のヘマトキシリンでもよい。この場合は過染気味に染色する。染色時間を10分間にする

※2 脱水

作業
95%エタノール 色落ちするので専用を使う

※3 脱水

作業
100%エタノール 1槽は色落ちするので専用を使う

染色液

Weigertの鉄ヘマトキシリン

使用時に第１液と第２液を等量混合する。

第１液

ヘマトキシリン	1g
100%エタノール	100ml

※温めると溶け易い。

第２液

40%塩化第２鉄	3ml
蒸留水	96ml
濃塩酸	1ml

※第１、２液ともに長期保存できるが、混合した後は長期保存できない。

Trichrome染色液

Chromotrope 2R	0.6g
Fast green FCF	0.3g
リンタングステン酸	0.6g
酢酸	1ml
蒸留水	100ml

※ 膠原線維を青くしたい場合はFast greenの代わりにアニリン青を使う
※ 長期保存可。

染色結果

核	黒紫
膠原線維	緑
筋、細胞質、赤血球、線維素	赤