⑪ 脱パラフィン ＆ 浸水

染色前に脱パラフィン、脱キシレン、浸水を行う。
脱パラフィンは組織にしみ込んだパラフィンを除去するために行う。
次に、脱パラフィンで用いるキシレンを100%エタノールで取り除く、つまり脱キシレンを行う。
さらに、濃度を順に低くしたエタノールにスライドを移動し最終的に流水洗する。

方法

• 良く洗い乾いた染色バットもしくはシャーレ（大型切片用）を用意する。
• パラフィンを溶かすためにキシレンⅠからⅢまで用意する（私たちは脱パラフィンを頻繁に行うためⅠからⅤまで用意している）。
• キシレンⅠ、Ⅱに最低10分間、キシレンⅢに最低5分間入れる。
• キシレンⅢの次にエタノールに入れてキシレンを除く。
• エタノールは100%、95%、70%と徐々に濃度を下げる。
• エタノールの各槽には5〜10分入れる。
• 最後に水道水で流水洗しエタノールを除く。
• 各液の取り替えは、Ⅰを捨てⅡをⅠにⅢをⅡにしてⅢを新しくすることで行う。

気をつけること

• 切片を次の液へ移す際、液を良く切ることで前の液を次の液に移さないようにする。濾紙などで拭ってから次の液に移すとより良い。こうすることで液の汚れが少なくなり、液が長持ちする。ただし、液を切っているうちに切片が乾かないように気をつける。
• 各種液が新鮮な場合は脱パラフィンが早くすむが、何回も使用した液では時間がかかることを考慮する。
• キシレンの中では切片は透明だが、キシレンからエタノールに切片を移すと切片が白くなる。
• キシレンからエタノールに移す際エタノールが白濁することがあるが、これは液が汚れているからである。この場合、切片をまずキシレンⅢに戻し、白濁したエタノールとキシレンⅠ、Ⅱを捨てる。さらにキシレンⅢをⅠとし、新たにキシレンⅡとⅢを用意する。そして再び脱パラフィンを行う。