作業ポイント

※1 ［水洗、媒染］

作業		色変化
水洗 蒸留水 1分×3回 ここからプラスチック製ピンセットを使う 媒染 前処理液 4時間〜1晩 （1晩おくと切片が少し黄色っぽくなる）		前処理前 前処理後 少し黄色っぽくなる

※2［水洗、還元］

作業		色変化
水洗 蒸留水洗 蒸留水1〜3槽 各槽で5回程度ずつ切片を揺らす 硝酸銀が落ちるためあまり長くはおかない 還元 還元液：20%ホルマリン溶液 （色が少し濃くなる）		還元前 還元後 色が濃くなる

※3［流水洗］

作業
水道水 数分

※4［水洗、鍍銀］

作業		色変化
水洗 蒸留水洗 蒸留水1〜3槽 各槽で5〜10回切片をゆらす 鍍銀 鍍銀液：メセナミン銀液 1時間 メセナミン銀液に切片を入れて60℃の恒温槽内で1時間くらい反応させる		反応前 反応後（褐色）
加温は使用機器やメセナミン銀液量、試料の状態など様々な要因で反応時間が異なる 目安として組織の色が褐色を呈するまで行う 組織によって反応時間が変わる。反応が悪い場合はさらに時間をおく

※5［水洗、鍍金］

作業		色変化
水洗 蒸留水洗 蒸留水1〜3槽 各槽で5〜10回切片をゆらす 鍍金 鍍金液：1%塩化金水溶液 1時間		反応前 1時間後（黒灰色）

※6［流水洗］

作業
水道水 15分

※7［還元］

作業		色変化
2%シュウ酸水溶液 5分 ここから金属器具を使ってもよい		反応前 反応後（黒紫色）

※8［流水洗］

作業
水道水 5分

※9［定着］

作業		色変化
定着液：写真の定着液（10倍希釈）もしくは5%チオ硫酸ナトリウム水溶液 10分		反応前 反応後（赤茶紫色）

※10［流水洗］

作業
水道水 10分以上

染色結果

老人斑と神経原線維変化

3%

5％

10%

メセナミン濃度の違いによる染色結果の違い

3%

5％

10%

zoomify画像

※ クリックすると拡大画像を見ることができます。

3%

5％

10%

スライドガラスによる染色結果の違い

コーティングによってはガラス全体に色がついてしまう。
我々はシランコーティングや卵白アルブミンコーティングを使用している。

プラチナプロコーティングガラスを使用

APSコーティングガラスを使用

試薬

• 前処理液
• 20%ホルマリン
• メセナミン銀液
• 1%塩化金水溶液
• 2%シュウ酸水溶液
• 写真の定着液（10倍希釈）

試薬の調整

前処理液

• 蒸留水にホウ酸を加え加温溶解する。
• ホウ酸が溶けたら硝酸銀、ピリジンを順に加える。

蒸留水	50 ml
ホウ酸	2.5 g
硝酸銀	2.5 g
ピリジン	5 ml

※ ピリジンは刺激臭があるので取り扱いの際はドラフト内で行う。

メセナミン銀液

• ホウ砂は加温して溶解しておく。
• メセナミン水溶液に硝酸銀水溶液を加えると一瞬白濁した後に透明になる。
• 透明になったのを確認してから蒸留水を加えて、ホウ砂水溶液を加える。
• よく撹拌した後にゼラチン液を加えてさらに混ぜる。

5%メセナミン水溶液	25ml
5 %硝酸銀水溶液	2.5 ml
蒸留水	12.5 ml
5 %ホウ砂水溶液	2.5 ml
0.1%ゼラチン液（羽賀改良法より）	12.5 ml

作り置きすると便利な試薬

5%メセナミン銀液（冷蔵保存）	5%硝酸銀溶液（冷蔵保存） ※長期保存すると黒く変色してくるので注意する	0.1%ゼラチン液（冷蔵保存）
1%塩化金水溶液（冷蔵保存）	2%シュウ酸水溶液	定着液 フジフィックス（富士フイルム） 使用時10倍希釈

※ 1%塩化金水溶液、2%シュウ酸水溶液、定着液は長期保存が可能で他の銀染色にも使用できるため、常備すると便利である。