脳病理標本作製ブログ Neurohistotechnology blog
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2019/10/18new

パラフィン包埋 Embedding

| by 関 絵里香
今日はパラフィン包埋です。包埋カセットは使わずにステンレスのバットを使います。他施設の年配の技師さんが見学に来たときに「まだ弁当箱使って包埋してるの?」と驚かれてしまいました。もちろん弁当箱ではありません。うちのラボでずっと使われてきた包埋皿です。それにしても、この方はアルミの弁当箱を代用していたのでしょうか?

This morning, paraffin embedding has been carried on. We use metal embedding molds instead of embedding cassettes. When we had a visitor who is a senior technician, she was surprised to see our embedding molds and said, "You still use a metal lunch box for embedding". Off course these are not lunch boxes. She might get used to using a metal lunch box to embed tissues.



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2019/10/17new

バキューム Vacuum impregnation

| by 関 絵里香
組織内の気泡とクロロホルムを排出するために、組織をバキュームにかけました。パラフィン3槽から4槽へ移る前に30分間から1時間程度バキュームします。帰る前に組織を4槽に入れて、明日はようやく組織を包埋します。

To evaporate chloroform and remove trapped air in the tissue blocks, I use a vacuum embedding device. The tissues were placed in the device for 30 minutes before transferred into the paraffin bath(4). Before going home, I transferred the tissues into the bath (4), and then I will embed the tissues in paraffin wax tomorrow.

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2019/10/17new

未染切片の到着 Arrival of unstained sections

| by 関 絵里香
共同研究者から染色依頼があり、未染切片が到着しました。未染切片が到着すると、まずやることは切片のパラフィンコーティングです。コーティングにはガラス標本コーティング装置を使用しています。これで多少は抗原性の減弱を遅らせることができるのではないかと思います。

A package of unstained sections has arrived from one of our research collaborators to immunostain them. I usually cover sections with paraffin wax on the arrival of unstained sections. There is a device to cover sections with thin paraffin film in our lab. I expect that it may hider the deterioration of antigens.


08:01 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/16new

パラフィン浸透 Paraffin infiltration

| by 関 絵里香
今朝、組織をパラフィン1槽に入れました。脳幹などの小さいブロックは小さな入れ物を、大脳前額断の大きいブロックは大型シャーレを使います。帰宅する前に2槽に入れます。

The tissues are now immersed in paraffin wax. I use a small container for smaller tissue blocks which is mostly from the brain stem and a big petri dish for bigger tissue blocks such as coronal blocks of a cerebral hemisphere to immerse the tissues in the paraffin wax. Before going home, I will transfer the tissues into paraffin bath (2).


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2019/10/16new

パラフィン交換 Refresh paraffin wax

| by 関 絵里香
今日から組織をパラフィンに入れます。昨日はその準備をしました。まず、パラフィン1槽のパラフィンを廃棄します。廃棄方法は、水に浮かべた紙箱の中にパラフィンをいれて、冷えて固まったら廃棄します。次に、2槽のパラフィンを1槽に移します。さらに、3槽を2槽に4槽を3槽に移します。最後に、4槽に新しいパラフィンを入れて修了です。

Today, the tissues will be transferred into paraffin wax. I prepared for paraffin infiltration yesterday. First, I discarded the paraffin wax in the bath(1).  The way to discard the paraffin wax is to pour it in a paper box floating in the water and dispose of it when it cools down. Then, I transferred the paraffin wax from the bath(2) to (1), (3) to (2), and (4) to (3). Finally, I refreshed paraffin wax for the bath(4).


08:59 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/11

週末は中間剤処理 Clearing process on the weekend

| by 関 絵里香
今日で脱水は6日目で100%エタノール4槽です。今日の午後に中間剤のクロロホルム1槽に移します。クロロホルムに組織を一週間程度入れておいても組織は固くならないので、週末に脳をクロロホルムに入れるようにスケジュールを調整しています。また、パラフィン包埋を来週の金曜日までに済ますために、火曜日の夕方にクロロホルム4槽に、水曜日の朝にパラフィン1槽に入れる予定です。

It is the sixth day of dehydration and the tissues are immersed in 100% ethanol(4).  The tissues will be transferred to a clearing agent, chloroform (1). Since chloroform has little effect to harden tissues,  it is OK to leave tissues in chloroform for a week. Therefore, we schedule the clearing process on weekends. I will transfer the tissues to chloroform (4) on Tuesday afternoon and to paraffin (1) on Wednesday morning to embed the tissues in paraffin wax on Friday.


09:55 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/10

固定が不十分な脳 Inadequate fixation

| by 関 絵里香
脳の固定は依頼者の責任で行います。ですから、固定された脳が私たちの研究室に搬入されます。今回の脳はホルマリンに満ちた小さな容器に入って運ばれてきました。脳が容器にぴっちり入っていて取り出すのが大変でした。移動用に小さな容器に脳を入れたのかと思いましたが、脳は容器の形に変形していたので、どうやらこの小さな容器で固定されていたようです。これでは固定液の量は不十分です。案の定、脳の内側の色はピンク色です。固定が不十分な色合いでした。このような脳ではきれいな標本を作製できないことがあります。残念ながら、このようなケースは、まれではありません。

The fixation of brains are performed on our clients' responsibilities, therefore fixed brains are brought to our lab. This time, the brain was brought in a small container full of formalin. It was difficult to take the brain out from the container because it was squeezed in the container. The brain might be put in such a small container just for transport. But the brain was deformed into the container shape, so it must be fixed in this container. The amount of formalin was not enough for fixation. As expected, the inside color of the brain was pinkish. This is because fixation was inadequate. Unfortunately, this is not an uncommon case.
16:37 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/08

脱水と組織の縮み Dehydration causes shrinkage of tissues

| by 関 絵里香
脱水行程は95%エタノール2槽目です。帰る前に95%エタノール3槽目に入れます。ところで、80%エタノールから95%エタノールに組織を入れてしばらくすると、組織が縮むのが肉眼的にも分かります。以前、エタノールにブタノールを混合して脱水すると組織の縮みが軽減すると教わりました。いつか検討してみたいと思いますが、中々チャンスがありません。

The tissue blocks are now immersed in 95% ethanol (2). Before going home, I will transfer the tissues to 95% ethanol(3). Tissue shrinkage is caused when tissues are transferred to 95% ethanol from 80% ethanol. I heard that a mixture of butyl alcohol and ethanol may keep the shrinkage of tissues a minimum. If I have a chance, I will try butyl alcohol.
10:37 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/07

久しぶりの切り出し Brain dissection

| by 関 絵里香
久しぶりに切り出しがありました。今週は脱水を行います。今は70%エタノール中に入っていますが、これから80%エタノールに液を変えます。今日帰宅する前に95%エタノールに液交換します。毎回フレッシュな液で脱水しています。お気づきの通り、私たちの教室には全自動包埋機はありません。毎日毎日検体がくるわけではないので、自動包埋機はあったのですが手放しました。件数が少ない場合は、手でまわす方が効率がよいと思います。

The brain dissection was performed in our lab. Now dehydration process is carried out. The tissue blocks were immersed in 70% ethanoI, so I changed the solution to 80% ethanol this morning, and  I will change it to 95% ethanol before I go home. I use fresh ethanol every time to dehydrate tissue blocks. By the way, we do not have a tissue processing machine. We had one before, but we got rid of it because we don't often have requests to dissect a whole brain. It might be efficient to process tissue blocks manually in the case the number of dehydration process performed is not many.

70% ethanol

80%ethanol

09:18 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2019/10/03

Gomori's one step trichrome method and Elastica-Van Gieson method

| by 関 絵里香
Gomori's one step trichrome method
Muscle, cytoplasm,red blood cells & fibrin-red, nuclei-purple, collagen-green

Elastica van gieson
Elastic fiber & nuclei-brown black, collagen-red, other tissue elements-yellow

14:55 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
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