脳病理標本作製ブログ Neurohistotechnology blog
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2020/10/23new

アーティファクト An artifact

| by erika seki
先日、勤務先の別グループの先生から新井先生にマウス切片を診てほしいとのご依頼がありました。遺伝子改変マウス脳のPFA固定、パラフィン包埋切片です。私も同席し標本を観察しました。すると、切片全体に空胞が散在しているのが目を引きます。新井先生曰く、空胞は血管ではないかとのこと。空胞は特異的な部位にあるわけではなく切片全体にありますし、また、正常マウス脳にもあるので病変ではなさそうです。自分で作製した標本ではないので断言は出来ませんが、固定もしくはパラフィン包埋過程で発生したアーティファクトと考えられます。さらにご依頼があれば、技術的にご支援したいと考えています。

The other day, Dr. Arai received a request from researchers in another group at my workplace to examine a mouse section. It is a PFA-fixed and a paraffin-embedded section of a genetically modified mouse brain. I also attended and observed the specimen. Then, it is noticeable that vacuoles are scattered throughout the section. According to Dr. Arai, the vacuoles may be blood vessels. The vacuoles are not in specific sites but in the entire section. They are also found in normal mouse brains, so they are unlikely to be lesions. I can't say for sure because it is not a specimen that I prepared, but it should be an artifact generated during the fixation or paraffin embedding process. If they have any further requests, I am willing to provide technical support.
09:37 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/10/21

なぜ切片がはがれたのか? Why the sections came off glass slides?

| by erika seki
先日染色した切片は、他施設で作製されたパラフィンブロックを私が薄切したものでした。薄切して気づいたことは、組織の部位によって柔らかいところと固いところがあるということです。柔らかい部位を含む切片は染色の過程ではがれてしまいました。なぜ切片ははがれてしまったのか、検証できたら良いなと思ってます。

I was talking about the sections peeled off from glass slides during the staining process in a recent blog. These sections were slices of paraffin blocks made at another facility. I sliced thinly and stained them. What I noticed by slicing them is that some parts of the tissue are soft and some are hard. The section containing the soft part came off glass slides during the staining process. I want to be able to verify why the sections peeled off.
11:31 | 投票する | 投票数(1) | コメント(0)
2020/10/20

切片がはがれました2 Sections came off a glass slide_2

| by erika seki
またまた切片がスライドグラスからはがれ落ちました。今回は脱パラして水洗した後にはがれました。仕方ないので浮遊切片として染色を続けました。しわしわになりましたが、なんとかできました。

The sections came off the glass slide again. This time, it came off during washing with water after deparaffinization. I couldn't help it, so I continued staining as floating sections. It became wrinkled, but I managed to do it.

10:24 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/10/19

切片がはがれました A section came off a glass slide.

| by erika seki
染色した後、アルコールで脱水している途中で切片がスライドガラスからはがれ落ちました。最悪です。仕方ないので、はがれた切片を硝子棒ですくいあげてキシレンに移して透徹しました。その後、スライドガラスの上にのせて封入しました。
シワシワになりましたが、染色結果は分かります。


After staining, a section came off a glass slide during dehydration. I couldn't help it, so I scooped up the peeled section with a glass stick and transferred it to xylene to make it transparent. After that, it was placed on a glass slide and coverslipped.
It became wrinkled, but you can see the result.


10:00 | 投票する | 投票数(1) | コメント(0)
2020/10/12

脱パラ deparaffinization

| by erika seki
薄切したのちに表面をパラフィンでコーティングすることがあります。薄切してすぐに染色できない場合にこのような処理をします。コーティングされた切片を用いて染色する場合、脱パラフィンに時間がかかります。場合によって第1槽に1時間ぐらいつけておく必要があります。今日はコーティング済みの切片を脱パラしているのですが、なかなかパラフィンが溶けてくれません。切片表面からはがれ落ちたパラフィン屑が雪のようにキシレンの中に浮遊しています。

We usually coat the surface of sliced sections with paraffin when we cannot dye them immediately after slicing. Deparaffinization takes time when dyeing with paraffin coated sections. In some cases, it may be necessary to leave it in the first tank of deparaffinization for about an hour. I carried out deparaffinization with the coated section today, but the paraffin doesn't melt easily. Paraffin debris that has fallen off the surface of the section is floating in xylene like snow.




11:11 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/09/18

クレシルバイオレット2 Cresyl violet 2

| by erika seki
メルクとシグマのクレシルバイオレット粉末を水に溶解して染色液を作製します。両者とも色はほとんど同じです。染色結果もほぼ同じと思います。KB染色の染色性はクレシルバイオレットの種類によって大きく変化することはないと言えます。それよりも、KB染色の染色結果は、検体の固定の状態によって左右されると感じます。特に固定が不十分な場合、良い染色結果は得られないと思います。

I dissolved Merck and Sigma Cresyl Violet powder in water to make a staining solution. Both are almost the same color. I think the staining results are almost the same. It can be said that the staining result of KB staining does not change significantly depending on the type of cresyl violet. Rather, I feel that the staining result of KB staining depends on the fixation state of the sample. I don't think you will get good staining results, especially if the fixation is inadequate.


08:58 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/09/17

クレシルバイオレット Cresyl violet

| by erika seki
KB染色で用いるクレシルバイオレットはメルクとシグマが販売しています。うちのラボには両方あります。どちらも濃い紫色の粉ですが、微妙に質感や色が異なります。水への溶けかたも異なります。会社によって製品のレシピとか製造方法が異なるのでしょうか?


The cresil violet used in KB staining is sold by Merck and Sigma. We have both in our lab. Both are dark purple powders, but the texture and color are slightly different. Each powder dissolves differently in water. Do different companies have different product recipes or manufacturing methods?


11:23 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/09/10

子供の脳と髄鞘化 The myelination of an infant's brain

| by erika seki
今日は6ヶ月の子供の脳をKB染色しました。まずはLFBで髄鞘を染色します。写真はLFB染色で分別しているところです。前回のブログでも書きましたが、子供は髄鞘化が進行中です。そのため、このうように大人とは異なるLFBの染色像が得られます。

Today I carried out KB stain with the brain of a 6-month-old child. First, I stained the myelin sheath with LFB and then stained the cell nucleus with cresyl violet. I took a photo after LFB staining. The photo shows how it looks like myelination is in progress.


16:22 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/09/02

お久しぶりです Long time no see!

| by erika seki
約1ヶ月ぶりのブログです。出勤はしていたものの、体調がすぐれずブログを書くエネルギーがありませんでした。9月になったし、そろそろ復活しようと思います。さて、最近子供の脳を取り扱う機会が続いています。生後間もない子供の脳では軸索の髄鞘化が急速に進展します。KB染色は髄鞘を青く神経細胞を青紫に染める染色ですが、この染色によって髄鞘化がどこまで進んでいるか分かります。写真は生後1ヶ月です。基底核は髄鞘化されていますがそれ以外の部分はまだです。

This is the first blog in about a month. Although I was working, I didn't feel well and didn't have the energy to write this blog. It's September, and I'm about to revive. By the way, we have the opportunity to handle the brains of infants. The myelination process has progressed rapidly in the brain of Newborn children. KB staining stains myelin sheaths blue and nerve cells blue-violet, and this staining clearly shows how the myelination progress. The photo shows the brain of a 1month baby. The basal ganglia are myelinated, but the rest is still.


10:20 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
2020/07/03

今日は天気がいいですね It is nice weather today

| by erika seki
一昨日までは毎日ずっと雨で湿度が高い日が続いていました。実験室の中もエアコンつけても、モワーと湿度が高く気持ち悪かったです。おかげで、写真のように脱パラ系列に結露がついてしまいました。こんな日は脱パラとか脱水とかしたくない気分になります。今日はいいですね。快晴ですから、脱パラ、脱水にうってつけです。

It has been raining these days. Humidity is very high even when I turned on the air conditioners in the lab. Because of the high humidity, dew condensation has formed on the lids of staining jars. The photo shows the dew condensation. I don't feel like using them for dehydration or deparaffinization. Today is good wether for dehydration and deparaffinization.


10:29 | 投票する | 投票数(0) | コメント(0)
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